ForHosting KIT · 開発者向けツール

A260からdsDNA濃度（ng/µL）を計算

この二本鎖DNA濃度計算ツールは、260 nmで測定した吸光度をナノグラム毎マイクロリットルへ換算し、希釈倍率も補正します。光路長1 cmではA260が1.0のとき50 ng/µLに相当するという一般的な換算係数を用います。測定したA260と全希釈倍率を入力すると、元試料の推定濃度を求められます。計算過程は決定論的で明確なため、日常的な核酸定量の作業に適しています。

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装置が実際に測定した値を入力してください

分光光度計または微量分光光度計に載せた試料について、260 nmで表示された吸光度を使用してください。この計算ツールでは0以上の数値を受け付け、標準的な二本鎖DNA換算係数の前提となる光路長1 cm相当の値として扱います。多くの微量測定装置は、表示する吸光度をすでに1 cmの光路長へ正規化しています。不明な場合は、装置の出力内容や測定法をご確認ください。ここでは吸光度から計算を始めるため、装置が算出した濃度を入力しないでください。無希釈で測定した場合、希釈倍率は1のままにします。バッファー、キュベット、測定面による吸光が推定値を押し上げることがあるため、適切なブランクで補正した測定値が望まれます。負の吸光度は物理的に意味のない負の濃度へ変換せず、入力エラーとして扱います。結果はA260から推定される質量濃度であり、吸光物質がすべて完全な二本鎖DNAであることを独立に証明するものではありません。

全希釈倍率は一度だけ適用してください

希釈倍率を使うことで、測定した希釈試料から元試料の濃度を逆算します。試料1に対して希釈液9を加えた場合、全量は10ですので10を入力します。1:20希釈なら20を入力してください。複数段階で希釈した場合は、それぞれの倍率を掛けてから入力します。たとえば10倍希釈の後に5倍希釈した場合、全希釈倍率は50です。この計算ツールは、測定したA260に吸光度1単位当たり50 ng/µLを掛け、さらに全希釈倍率を掛けます。希釈補正を二重に適用しないようご注意ください。装置のソフトウェアが表示吸光度をすでに希釈補正している場合は1を使用し、希釈試料の未補正値を表示している場合は実際の全倍率を使用します。結果とともに希釈条件を記録すれば計算を再現でき、低い測定吸光度と元のチューブ内での低濃度を明確に区別できます。

生化学的な背景を踏まえて推定値をご判断ください

出力濃度は、二本鎖DNAについて一般に用いられる関係式に基づきます。ng/µL単位の濃度は、A260に50と希釈倍率を掛けた値です。1 ng/µLと1 µg/mLは数値として等しいため、追加の単位換算は必要ありません。ただし、吸光度は二本鎖DNAだけを選択的に測定するものではありません。RNA、一本鎖核酸、遊離ヌクレオチド、フェノールなども260 nm付近の吸光に寄与する可能性があります。選択性や低濃度域での精度が重要な場合は、A260/A280およびA260/A230の純度比、適切なブランク、二本鎖DNAに特異的な蛍光アッセイもご検討ください。この計算では断片化、増幅可能性、生物学的完全性は評価しません。結果は、1 cmの規約に基づいてA260から得た質量濃度の推定値としてお取り扱いください。後工程では計算値だけに依存せず、アッセイの要件、想定純度、装置の実用的な精度範囲と併せてご判断ください。

活用例

原液の濃度を逆算する

希釈試料の吸光度から、元のチューブに含まれるDNAの推定濃度をng/µLで求めます。

DNA投入量を標準化する

PCR、消化、ライゲーション、ライブラリー調製に必要な試料量を決める前に濃度を推定します。

装置による計算を確認する

一般的なA260換算を独立に再現し、吸光度、希釈倍率、適用した二本鎖DNA係数を記録します。

よくある質問

どの計算式を使用しますか？

濃度 (ng/µL) = A260 × 50 × 希釈倍率を使用します。50は光路長1 cmで二本鎖DNAに用いる一般的な係数です。

どの希釈倍率を入力すればよいですか？

希釈後の全量を試料量で割った比率を入力してください。無希釈は1、10倍希釈は10とし、連続希釈では各倍率を掛け合わせます。

µg/mLからng/µLへの換算は必要ですか？

必要ありません。両単位の数値は等しいため、25 µg/mLは25 ng/µLでもあります。

夾雑物によって結果が高くなることはありますか？

はい。260 nm付近で吸光する物質は推定値を高める可能性があります。純度比や二本鎖DNA特異的な蛍光アッセイも判断材料になります。

RNAや一本鎖DNAにも使用できますか？

同じ係数では使用できません。この機能は二本鎖DNA専用であり、ほかの核酸種には異なる一般的なA260係数があります。

APIでの計算料金はいくらですか？

APIリクエスト1回の料金は$0.002です。同じ決定論的な計算をブラウザーでも実行できます。

開発者向け — APIアクセス

このページの機能はすべてAPIからも利用できます。自社システムに組み込みたいチーム向けのセクションです。それ以外の方は上のツールをそのままお使いください。

エンドポイント

POSThttps://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul

Bearerトークンで認証し、POST1回でタスクをキューに登録します。結果はWebhookまたは署名付きリンクで受け取れます。

お使いのスタックから呼び出す

curl -X POST https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul \
  -H "Authorization: Bearer $KIT_KEY" \
  -H "Content-Type: application/json" \
  -d '{"absorbance_260":0.24}'

const res = await fetch("https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul", {
  method: "POST",
  headers: {
    "Authorization": `Bearer ${process.env.KIT_KEY}`,
    "Content-Type": "application/json"
  },
  body: JSON.stringify({
    "absorbance_260": 0.24
  })
});
const { task_id } = await res.json();

import os, requests

res = requests.post(
    "https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul",
    headers={"Authorization": f"Bearer {os.environ['KIT_KEY']}"},
    json={
    "absorbance_260": 0.24
},
)
task_id = res.json()["task_id"]

<?php
$res = file_get_contents("https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul", false, stream_context_create([
  "http" => [
    "method"  => "POST",
    "header"  => "Authorization: Bearer " . getenv("KIT_KEY") . "\r\nContent-Type: application/json",
    "content" => '{"absorbance_260":0.24}',
  ],
]));
$task = json_decode($res, true);

body := bytes.NewBufferString(`{"absorbance_260":0.24}`)
req, _ := http.NewRequest("POST", "https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul", body)
req.Header.Set("Authorization", "Bearer "+os.Getenv("KIT_KEY"))
req.Header.Set("Content-Type", "application/json")
res, _ := http.DefaultClient.Do(req)

リクエスト例

{
  "absorbance_260": 0.24
}

レスポンス例

{
  "task_id": "tsk_a1b2c3d4e5f6a1b2c3d4e5f6",
  "type": "bio.dsdna_ng_per_ul",
  "status": "queued",
  "_links": {
    "result": "/tasks/tsk_…/result"
  }
}

非同期APIです。task_idは即時に返ります。ポーリングは1秒あたり1リクエストまでです。

料金

1リクエストあたり$0.002

単価はすべて公開しています。トークン換算や独自クレジットはありません。失敗したタスクは課金されません。

エラー

HTTP	コード	意味
`401`	`unauthorized`	APIキーが無効か、指定されていません。Authorizationヘッダーを確認してください。
`402`	`insufficient_balance`	残高が不足しています。チャージ後に再度お試しください。
`404`	`unknown_type`	指定されたタスクタイプは存在しません。タイプ名を確認してください。
`429`	`rate_limited`	リクエストが多すぎます。しばらく待ってから再度お試しください。

KITの完全なドキュメントを見る →